技術資料 凍干菌種復蘇操作方法

1、檢查產品的有效期，按照說明書準備好菌株復蘇所需要的75%消毒酒精、廢液缸、接種
環、鑷子、打火機、酒精燈與培養基平板、斜面。

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2、用75%酒精對產品表面進行消毒。待干，按照瓶藍蓋上箭頭方向剝開密封包裝。

3、調校移液槍（或準備無菌吸管）。吸取配套的復蘇液體約300-500uL。

4、將復蘇液直接添加到凍干菌粉瓶中，用移液槍或吸管反復吸打混勻（注意：吸打時槍頭不
能離開液面，避免產生氣溶膠）。

5、燒環，挑取滿一環菌液，劃線至試管斜面中（M1，第一代菌株可以用于保存）。

6、燒環，挑取滿一環菌液，劃線至平板瓊脂中（M1，第一代菌株用于工作實驗）。
（備注：同時吸取少量的菌懸液，約50-100uL直接滴加到平板中央，以防劃線平板、斜面無法成功復蘇）。

7、用油性筆寫上菌種信息、日期、代數等信息，按說明要求放置于適應溫度的培養箱中培養。

8、將剩余的菌懸液和接種平板、斜面同時培養，如成功復蘇，平板和斜面均生長良好。

9、注意事項
（1）請開凍干之前檢查產品的完整性，是否仍在保質期內。
（2）操作之前必須先詳細閱讀使用說明書，并準備好需要的培養基和培養條件。
（3）凍干菌粉和配套肉湯均為一次性使用產品，開啟后不能再次保存。
（4）如培養之后平板和斜面均無菌生長，請將同時培養菌懸液再次劃線新的平板和斜面。
（5）使用之后的剩余產品必須經過生物無害化處理（121℃，滅菌15 分鐘滅活。）