純化抗原的鑒定主要包括哪幾個方面

作者： 2019年09月20日來源：全球化工設備網瀏覽量：

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純化抗原的鑒定方法較多，常用的有聚丙烯酰胺凝膠電泳法、結晶法、免疫電泳法、免疫雙擴散法等。事實上，僅用一種方法還無法作純度鑒定，只有幾種方法聯合應用才較可靠。結晶法不是純度的標準，因結晶中往往含有其它

純化抗原的鑒定方法較多，常用的有聚丙烯酰胺凝膠電泳法、結晶法、免疫電泳法、免疫雙擴散法等。事實上，僅用一種方法還無法作純度鑒定，只有幾種方法聯合應用才較可靠。結晶法不是純度的標準，因結晶中往往含有其它成分。電泳譜中呈現單一區帶也不能排除在這條帶中含有其他成分。有時雖出現幾條帶，也可能是同一物質的聚合體或降解物。為獲得好的免疫效果，抗原純化后應進行鑒定才能用于動物免疫，抗原的鑒定主要包括以下幾個方面：

1、含量檢測
蛋白含量的測定zui準確的方法是凱氏定氮法，但由于要求有精密設備，故不適合一般實驗室。一般實驗室均采用分光光度計測量法。該法首先測定280nm和260nm的吸光度（A），再用經驗公式計算蛋白含量。
蛋白含量（mg/ml）=A280×1.45-A260×0.74。
另外蛋白含量也可采用福林酚法，具體操作見臨床生化技術。
2、分子量的鑒定
測定分子量一般采用SDS-PAGE電泳法，詳見臨床生化技術。
3、純度鑒定
常采用區帶電泳法鑒定，詳見臨床生化技術。
4、免疫活性鑒定
常采用雙向瓊脂擴散試驗。

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